产品货号:
MT0045
中文名称:
基因组DNA提取试剂盒
英文名称:
Universal gDNA Extraction Kit
产品规格:
50T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本试剂盒用独特的裂解液,可在20分钟内快速可靠的从动物组织、细胞、细菌、病毒、全血、血清、血浆、体液、病毒液、拭子等样品中纯化出高纯度的DNA。应用本试剂盒提取的DNA可直接用于限制性酶切反应、PCR、文库构建、Southern杂交等多种分子生物学实验。
组分 | 规格 |
Buffer AP4 | 2.5mL |
Buffer LB5 | 25mL |
Washing Buffer(已含乙醇) | 55mL |
蛋白酶K(20mg/mL) | 1mL |
RNaseA(20mg/mL) | 0.25mL |
DNA Elution Buffer | 10mL |
吸附柱 | 50套 |
2mL Nuclease Free收集管 | 50个 |
保存:室温避光,有效期1年。
- 本试剂盒中的Washing Buffer中已经加乙醇,无需单独添加。
- Buffer AP4和Buffer LB5,储存时可能会有白色结晶沉淀,放置于56℃水浴锅溶解后,不影响使用效果。两个溶液使用前请放置到56℃水浴锅进行预热。
本试剂盒分别提取组织、细胞和细菌的基因组DNA。1-2:小鼠鼠尾、3-4:A549细胞、5-6:人抗凝全血、7-8:培养细菌。
- RNA含量较高的动物组织、细胞、细菌样本的提取方法
- 样品组织悬液的制备:
- 动物组织用研钵研磨:将动物组织研磨粉碎,并取40~60mg加入到1.5mL EP管中,加入280μL无菌水,漩涡震荡10s混合均匀,打开管盖加入50μL的Buffer AP4裂解液和5μL的RnaseA,漩涡震荡10s混合均匀,室温消化5min,以去除RNA。
动物组织用钢珠研磨:取50~80mg组织加入到400μL无菌水,在研磨仪上研磨1min。在1.5mL EP管底部加入50μL的Buffer AP4裂解液,并在管盖上加入5μL的RnaseA,取280μL研磨好的组织悬液到1.5mL EP管中,漩涡10s混合均匀,室温消化5min,以去除RNA。 - 悬浮的细胞(104~108个)或细菌(106~1011个):在1.5mL EP管底部加入50μL的Buffer AP4裂解液,并在管盖上加入5μL的Rnase A,直接吸取280μL样品到上述EP管中,漩涡震荡10s混合均匀,室温消化5min,以去除RNA。
- 细胞或细菌沉淀:可用280μL无菌水重悬细胞和细菌沉淀,并加入50μL的Buffer AP4裂解液和5μL的RnaseA,漩涡震荡10s混合均匀,室温消化5min,以去除RNA。
- 动物组织用研钵研磨:将动物组织研磨粉碎,并取40~60mg加入到1.5mL EP管中,加入280μL无菌水,漩涡震荡10s混合均匀,打开管盖加入50μL的Buffer AP4裂解液和5μL的RnaseA,漩涡震荡10s混合均匀,室温消化5min,以去除RNA。
- RNA消化完毕后,向上述溶液中加入20μL的蛋白酶K,漩涡10s混合均匀,并置于56℃水浴锅(或室温条件下)中消化5min。
- 消化完毕后,向上述溶液中加入500μL的Buffer LB5,漩涡混合15s后,13000rpm最高转速离心2min。将上清液倒入到吸附柱中。
- 13000rpm离心1min,弃过柱液。向吸附柱中加入500μL的Washing Buffer,13000rpm离心15s。弃过柱液,并重复此步骤一次。
- 将吸附柱重新放回离心机,13000rpm空离心2min,将残留的乙醇彻底甩干。
- 将吸附柱芯放入到1.5mL收集管中,向吸附柱芯中加入60~150μL DNA Elution Buffer,室温放置1min,13000rpm离心2min,洗脱液即为基因组DNA,冷冻保存。
- 样品组织悬液的制备:
- RNA含量较低的样本(全血、血清、血浆、体液、病毒液、棉拭子浸泡液等)的提取方法
在1.5mL EP管底部预先加入50μL的Buffer AP4裂解液,在管盖上加入20μL的蛋白酶K,直接吸取280μL的液体样本到Buffer AP4裂解液中。上下颠倒,并漩涡混合10s,使得样品、Buffer AP4裂解液、蛋白酶K混合均匀,并置于56℃水浴锅中(或室温)消化5min。
按照上述步骤A.3-A.6进行上柱、漂洗、洗脱操作。
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